嬰幼兒配方乳粉中高氯酸鹽的UPLC-MS/MS測(cè)定的解決方案
嬰幼兒配方乳粉中高氯酸鹽和氯酸鹽的UPLC-MS/MS測(cè)定的解決方案【W(wǎng)aters Torus DEA色譜柱方法譜圖】
在如今的食品行業(yè)的生產(chǎn)和檢測(cè)中，氯酸鹽是新型的具有高穩(wěn)定性、高擴(kuò)散性和持久性的污染物質(zhì)。其環(huán)境污染問(wèn)題引起了環(huán)境學(xué)家和衛(wèi)生學(xué)家的高度關(guān)注，已經(jīng)成為目前國(guó)際學(xué)術(shù)界的研究熱點(diǎn)之一。氯酸鹽是典型的難降解，具有高度擴(kuò)散性的持久性無(wú)機(jī)污染物。由于能影響機(jī)體甲狀腺的正常功能，并有可能一定程度造成血紅細(xì)胞破壞和肝，腎臟損傷，相關(guān)環(huán)境污染和人體健康**問(wèn)題引起了研究者的高度重視。在深入了解其的環(huán)境化學(xué)特性與危害的基礎(chǔ)上將其有效去除是近年來(lái)的研究重點(diǎn)和難點(diǎn)。BJS 201706規(guī)定了食品中氯酸鹽和高氯酸鹽含量的液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定方法。適用于嬰幼兒配方乳粉等食品的氯酸鹽和高氯酸鹽的測(cè)定。BJS 201706方法推薦使用的是復(fù)合離子交換柱，然而我們收到很多用戶反映，按照方法推薦使用的復(fù)合離子交換柱分析檢測(cè)奶粉中的高氯酸鹽和氯酸鹽時(shí)，出現(xiàn)保留時(shí)間漂移，基質(zhì)干擾嚴(yán)重以至于氯酸鹽無(wú)法檢測(cè)；而且前處理方法，使用甲醇為提取液，凈化后的樣液放置過(guò)夜后，瓶底有晶體析出，凈化效果不好。針對(duì)客戶的困擾，我們經(jīng)過(guò)溝通發(fā)現(xiàn)，使用 Waters Torus DEA色譜柱，能很好的解決以上問(wèn)題。
本實(shí)驗(yàn)采用Torus DEA色譜柱來(lái)分析嬰幼兒配方乳粉中高氯酸鹽和氯酸鹽的含量。
將標(biāo)準(zhǔn)BJS 201706方法中用到的甲醇提取液換成了乙腈，過(guò)PRIME HLB固相萃取柱后，
得到了更好的凈化效果，同時(shí)也滿足該方法中關(guān)于靈敏度，準(zhǔn)確度及重現(xiàn)性的要求。 提
提取
準(zhǔn)確稱取1 g(精 確至0.001 g)試樣置于50 mL具塞離心管中，加入混合同位素內(nèi)標(biāo)液，準(zhǔn)確加入5.0 mL0.1%甲酸水溶液，迅速混勻，置于水浴超聲20 min，渦旋振蕩5 min，再準(zhǔn)確加入10.0 mL乙腈，混勻，于水浴超聲10 min，10000 r/min常溫離心10 min，靜置30 min后取上清液待凈化。
凈化
吸取約3.0 mL上述離心上清液，過(guò)PRIMEHLB(P/N:186008057)固相萃取柱，收集續(xù)濾液后，過(guò)0.2 μmGHP濾膜(WAT097962)，裝入2 mL樣品瓶(溶液澄清)，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定用。
色譜條件
儀器系統(tǒng)：ACQUITY UPLC®I-Class system
色譜柱：Torus DEA Column, 130? 1.7 μm, 2.1×100mm(P/N:186007616)
流動(dòng)相A：乙腈
流動(dòng)相B：20 mM 甲酸銨緩沖液(pH=3.0)
流 速：0.45 mL/min
柱 溫：35?C
進(jìn)樣量: 1 μL。
質(zhì)譜條件
質(zhì)譜系統(tǒng)：Xevo TQ-S Micro 質(zhì)譜儀
電離模式：ESI-
電離電壓：0.75 KV
脫溶劑氣：流量1000 L/hour
溫度：500 ?C
MRM 檢測(cè)參數(shù)見(jiàn)下表：
表中:
ClO3- 定量離子對(duì)為: 82.9681>66.9031
ClO4- 定量離子對(duì)為: 98.9681>82.9183
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
ClO3-和ClO4-出峰正常，如下圖：
ClO3-在0.5-50ng/mL濃度之間，相關(guān)系數(shù)R2>0.997。
ClO4-在0.5-50ng/mL濃度之間,相關(guān)系數(shù)R2>0.999。
本方法在空白樣品中加標(biāo)75、150 μg/kg添加濃度時(shí)，回收率在80%～110%之間。
凈化效果比較
將提取液中的甲醇換成乙腈后，再過(guò)PRIME HLB小柱，經(jīng)此改進(jìn)，樣品溶液放置幾天仍保持澄清，未出現(xiàn)沉淀物，如下圖：
重現(xiàn)性
樣本連續(xù)6針進(jìn)樣重現(xiàn)性結(jié)果如下圖所示，
含量重現(xiàn)性ClO3-:RSD為5.8%，ClO4-:RSD為2.1%;
RT重現(xiàn)性:ClO3-:和ClO4-RSD均<0.1%,
未出現(xiàn)保留時(shí)間漂移的現(xiàn)象。
如下圖：
討論
PRIME HLB小柱
(PN:186008057,6cc/200mg)
具有很好的去磷脂，脂肪的作用，過(guò)柱后的供試品溶液減少了污染色譜柱的風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)也大大降低基質(zhì)效應(yīng)。
Torus DEA色譜柱
作為HILIC機(jī)理色譜柱使用,須按Hilic柱的方法測(cè)柱效,而且須用50 mM以上濃度的緩沖鹽作為水相流動(dòng)相測(cè)試,用后保存在95:5(V:V)=乙腈:水中。
此色譜柱原為UPC2色譜柱，故初次用作高氯酸鹽，氯酸鹽測(cè)試時(shí)，應(yīng)使用適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相將其轉(zhuǎn)換為HILIC模式。
如果對(duì)本期話題有興趣，或者對(duì)色譜柱的使用/維護(hù)方面有任何問(wèn)題，請(qǐng)聯(lián)系Waters授權(quán)代理商：廣州綠百草。
