在色譜分析中,正相色譜柱和反向色譜柱是兩種常用的填料類型,其選擇和使用取決于樣品的性質(zhì)以及所需的分離效果。正相色譜柱的固定相為極性鍵合固定相,而反相色譜柱的固定相為非極性鍵合固定相。
正相色譜柱的固定相通常由具有極性有機(jī)基團(tuán)的硅膠表面鍵合而成。常見的鍵合相包括氰基(-CN)、氨基(-NH2)和二醇基(DIOL)。這些鍵合相的命名取決于鍵合在硅膠上的有機(jī)基團(tuán)。正相色譜柱用于分離極性化合物,其中組分的保留值隨其極性的增加而增大。流動相通常選擇比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機(jī)溶劑,如烴類溶劑,并可以加入一定量的極性溶劑(如氯仿、醇、乙腈等)以調(diào)節(jié)流動相的洗脫強(qiáng)度。
反相色譜柱的固定相常為非極性鍵合固定相,如硅膠-C18H37(簡稱ODS或C18)或硅膠-苯基等。反相色譜柱使用較強(qiáng)極性的溶劑作為流動相,如甲醇/水、乙腈/水、水和無機(jī)鹽的緩沖液等。樣品在反相色譜柱上的保留順序與極性相反,極性較強(qiáng)的組分*先被沖洗出色譜柱,而極性弱的組分會在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。
正相色譜柱和反向色譜柱的關(guān)鍵區(qū)別在于固定相的性質(zhì)。正相色譜柱的填料極性較強(qiáng),洗脫順序為由弱到強(qiáng),而反向色譜柱的填料極性較弱,洗脫順序為由強(qiáng)到弱。這意味著正相色譜柱適合分離極性較弱的化合物,而反向色譜柱適合分離極性較強(qiáng)的化合物。
正相色譜和反相色譜在色譜分析中扮演著不同的角色。正相色譜主要用于分離異構(gòu)體、極性不同的化合物,以及不同類型的化合物,而反相色譜更適合對于組分極性較強(qiáng)的樣品進(jìn)行分離。
綜上所述,正相色譜柱和反向色譜柱具有不同的固定相特點(diǎn)和適用范圍。選擇正確的色譜柱類型對于有效的分離和分析非常重要,根據(jù)需要合理選擇正相色譜或反向色譜柱將有助于獲得準(zhǔn)確的結(jié)果和可靠的分析數(shù)據(jù)。