產(chǎn)品貨號:
產(chǎn)品名稱:
PolyLC PolyPROPYLA色譜柱
產(chǎn)品規(guī)格:
產(chǎn)品品牌:
PolyLC
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簡單介紹
PolyPROPYLA色譜柱是硅膠基材料,可通過疏水相互作用(HIC),HIC分離蛋白的方法是基于蛋白質(zhì)的疏水特點,比如RPC。但是,HIC使用完全含水的緩沖器,保留住了蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)和生物活性。這種分離性通常優(yōu)于RPC方法分離蛋白質(zhì)和多肽,能夠極大的保留蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)。
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品描述
PolyPROPYLA色譜柱是硅膠基材料,可通過疏水相互作用(HIC),HIC分離蛋白的方法是基于蛋白質(zhì)的疏水特點,比如RPC。但是,HIC使用完全含水的緩沖器,保留住了蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)和生物活性。這種分離性通常優(yōu)于RPC方法分離蛋白質(zhì)和多肽,能夠極大的保留蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)。通常情況下,樣品使用硫酸鹽或磷酸鹽等鹽濃度降低梯度洗脫,通過增加蛋白質(zhì)表面疏水性將其洗脫。表面活性劑(例如丙磺酸;辛基糖苷)如果必要的話可以被添加到流動相的。PolyPROPYLA的相對疏水值為100。HIC比其他方法有更大的敏感性,尤其是涉及到非極性基團(tuán)。HIC適用于:
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多維蛋白純化(建議順序:離子交換-鹽梯度洗滌分離-HIC)。
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多肽的純化(比如毒液、糖肽類)
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表面抗體
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質(zhì)量控制分析蛋白質(zhì)的單一殘基的極性或者突變體的修飾位點。
大于20KDa的蛋白質(zhì)建議使用1000 -或1500-A的孔。其能力可以與離子交換相媲美。除非該蛋白是公認(rèn)的顯著疏水性,建議使用PolyPROPYL A。
HIC 的問題:
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脫鹽:不幸的是,HIC 中使用的鹽不可凍干。它們可以使用色譜法(空間排阻、反相等)或透析從樣品中去除。
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基線:HIC 中使用的顯著鹽濃度梯度導(dǎo)致流動相的折射率發(fā)生巨大變化。這可能會導(dǎo)致基線出現(xiàn)人為峰。例如,當(dāng)在 220 nm 處監(jiān)測流出物時,使用硫酸銨梯度會產(chǎn)生一個上升的基線,并具有較寬的*大值。根據(jù)使用的鹽和波長,可能會觀察到基線上升或下降。該問題在 254nm 和 280nm 處不太嚴(yán)重?;€的變化對可以在線可靠檢測的蛋白質(zhì)量施加了一個下限。如果蛋白質(zhì)或肽含有色氨酸,則通過監(jiān)測熒光而不是吸光度可以完全消除該問題。
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變性:HIC促進(jìn)三級結(jié)構(gòu)的保留,大部分蛋白質(zhì)被回收,80-100%的生物活性保留。但是,四元結(jié)構(gòu)可能會受到影響;使用的高鹽濃度會導(dǎo)致一些含有亞基的蛋白質(zhì)分解。這種影響通常與列無關(guān),并且必須在每個單獨的情況下進(jìn)行評估。
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聚合:一般來說,這不是一個大問題。傾向于在溶液中聚集的混合物有時會從 HIC 柱中以離散峰形式洗脫。聚集通常涉及疏水相互作用,但似乎色譜柱填料的疏水表面超過了單個蛋白質(zhì)單體相互結(jié)合的趨勢。
規(guī)格
具有 2μm 顆粒的色譜柱 (孔徑選項:-10、-15。其他可用:ASK)
含有 3μm 顆粒的色譜柱 (孔徑選項:-05、-08、-10、-15)
含有 5μm 顆粒的色譜柱 (孔徑選項:-03、-10)
提供 12μm 顆粒的色譜柱 (孔徑選項:-03、-15)
規(guī)格
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項目編號
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200 x 4.6 毫米
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204PR12——
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200 x 9.4 毫米
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209PR12——
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250 x 9.4 毫米
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259PR12——
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250 x 21.0mm
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2521PR12——
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250 x 50.8 毫米
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2550PR12——
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