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固相萃取技術(shù)是前處理技術(shù)的一種,其原理與高效液相色譜相似。*常見的是應(yīng)用于樣品凈化、樣品的痕量富集、脫鹽、溶劑替換等。
(關(guān)于固相萃取小柱常見的使用問題,你可能也想知道!)
在平時(shí)與客戶的交流中,發(fā)現(xiàn)一些親經(jīng)常會(huì)遇到一些問題。現(xiàn)在我們就針對(duì)不同行業(yè)的一些常見的問題進(jìn)行解答。
問
對(duì)一個(gè)樣品進(jìn)行前處理,應(yīng)如何選擇小柱的固定相?
答
根據(jù)目標(biāo)化合物與干擾物的差異,如極性,分子量,pka值等,選擇合適的填料。
問
確定了小柱的固定相,那應(yīng)該如何選擇規(guī)格?
答
固相萃取小柱的規(guī)格一般使用mg/ml表示,其中mg/ml表示填料重量、填料上方一次所能承載的*大溶液體積。
洗脫體積一般為填料床體積的2-5倍。
吸附容量:硅膠基質(zhì)填料所能吸附的被測(cè)物和干擾物的*大重量,一般不超過填料重量的5%;
聚合物基質(zhì)填料所能吸附的被測(cè)物和干擾物的*大重量,一般不超過填料重量的10-15%。
因此在選擇固相萃取小柱規(guī)格時(shí)需要先預(yù)估吸附的被測(cè)物和干擾物重量,再去換算即可知道應(yīng)選擇什么規(guī)格更合適了!
以waters oasis HLB 30cc/60mg的小柱為例,此為聚合物填料小柱,該小柱能吸附被測(cè)物和干擾物*大重量=10-15%×60mg=6-9mg。
問
固相萃取小柱能重復(fù)使用嗎?
答
理論上是可以沖洗干凈重復(fù)使用的;
但在實(shí)際實(shí)驗(yàn)操作過程中不建議重復(fù)使用,因?yàn)樵跊_洗過程中不能保證完全沖洗干凈,其殘留物質(zhì)在下次使用可能會(huì)對(duì)被測(cè)物造成干擾,導(dǎo)致回收率和重現(xiàn)性差!
(關(guān)于固相萃取小柱常見的使用問題,你可能也想知道!)
問
同樣固定相規(guī)格但不同品牌的固相萃取小柱做同一樣品為什么回收率不一樣?
答
不同品牌的小柱雖然固定相等規(guī)格也一樣,但是其填料的來源,鍵合的技術(shù)、裝填的工藝不一樣,這些因素都會(huì)導(dǎo)致樣品回收率的差異!
問
標(biāo)準(zhǔn)上規(guī)定某一品牌的固相萃取小柱,可以用同樣規(guī)格其他品牌的小柱替代嗎?
答
理論上都是可以的,
但有些時(shí)候測(cè)定的基質(zhì)和物質(zhì)比較復(fù)雜,用標(biāo)準(zhǔn)推薦的固相萃取小柱可能會(huì)達(dá)到更好的回收率和重現(xiàn)性!
如waters oasis系列的固相萃取小柱在獸殘前處理時(shí)候相比于其他品牌的小柱會(huì)獲得更好的回收率和重現(xiàn)性!
當(dāng)然,實(shí)驗(yàn)過程中可能還會(huì)遇到更多的問題,以上列舉的只是冰山一角!
小編在這向大家推薦一本寶典——《固相萃取技術(shù)與應(yīng)用》。
這本書詳細(xì)介紹了固相萃取原理、方法的建立與優(yōu)化!對(duì)應(yīng)用中經(jīng)常遇到的問題提出了解決辦法!
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